3 resultados para Trypanossoma cruzi Teses
em Cor-Ciencia - Acuerdo de Bibliotecas Universitarias de Córdoba (ABUC), Argentina
Resumo:
Trypanosoma cruzi es el agente causal de la enfermedad de Chagas, un problema de salud importante en Amrica Latina, as como tambin en Amrica Central, ya que causa infeccin crnica afectando a millones de personas [1]. Durante esta enfermedad se han descripto varias alteraciones de la respuesta inmune, entre ellas una severa inmunosupresin durante la etapa aguda de la infeccin, tanto en humanos como en ratones. Clulas T provenientes de ratones infectados activadas in vitro, muestran reduccin en la respuesta proliferativa a mitgenos, caracterstica de un estado de inmunosupresin [2-4]. La falla del sistema inmune durante estadios tempranos de la infeccin probablemente colabore con la diseminacin y el establecimiento del parsito. Un gran nmero de estudios se han focalizado en la identificacin de mecanismos moleculares responsables del fenmeno de inmunosupresin, entre los mecanismos citados se ha demostrado presencia de clulas supresoras [5-9], factores inmunosupresores presentes en el parsito [2, 3, 10-13], produccin excesiva de xido ntrico [14], disminuida produccin de IL-2 y reducida expresin del receptor de IL2 en clulas de bazo de animales infectados [9, 15-17]. Muchos de estos mecanismos han sido exhaustivamente investigados, sin embargo no est del todo claro si existen mecanismos adicionales involucrados en la inmunosupresin de la clula T. Adicionalmente, en los ltimos aos nuevas molculas que median la regulacin negativa de la clula T, entre las cuales estn PD-1/PD1-L [18], arginasa [19] y E3 ubiquitina ligasas [20-22], han sido reportadas durante inmunosupresin en diversas infecciones.
Resumo:
La infeccin de mamferos con el T. cruzi resulta en diferentes alteraciones inmunolgicas que permiten la persistencia crnica del parsito y destruccin inflamatoria progresiva del tejido cardiaco, nervioso y heptico. Los mecanismos responsables de la patologa de la enfermedad de Chagas han sido materia de intensa investigacin habindose propuesto que el dao producido en esta enfermedad puede ser consecuencia de la respuesta inflamatoria del individuo infectado y/o de una accin directa del parsito sobre los tejidos del hospedador. El propsito del presente proyecto es estudiar comparativamente, en dos cepas de ratones con diferente susceptibilidad a la infeccin y desarrollo de patologa, la participacin y los mecanismos efectores de las clulas supresoras mieloides (CSM) y las celulas T regulatorias inducidas por la infeccin experimental con Trypanosoma cruzi en el control de la infeccin con este protozoario y en el desarrollo de la patologa heptica siendo los objetivos especificos desarrolar: - Investigar la generacin y/o reclutamiento de clulas de CSM en bazo e hgado de ratones infectados con Trypanosoma cruzi y su contribucin a la desigual susceptibilidad a la infeccin y respuesta inmune desarrollada en las cepas de ratones BALB/c y C57BL/6; - Investigar la capacidad de las CSM inducidas por la infeccin con T. cruzi en bazo e hgado de ratones de ambas cepas para suprimir la respuesta de clulas T in vitro e indagar sobre los mecanismos de supresin utilizados; - Investigar la generacin y/o reclutamiento de clulas Treg durante la infeccin experimental con Trypanosoma cruzi, su participacin en la desigual susceptibilidad a la infeccin y respuesta inmune desarrollada en ambas cepas de ratones y los mecanismos de supresin utilizados. - Analizar en tejido heptico o leucocitos infiltrantes la presencia de COX2, PGE2, MMP2 y 9, IL1b, IL6, IDO, IL10 y GM-CSF capaces de inducir la expansin de las CSM; - Dilucidar si la administracin del ligando para TLR2 (Pam3CyS) previo a la infeccin de ratones C57BL/6 (en los cuales se detecta un menor nmero de CSM) es capaz de modular la respuesta inflamatoria y el dao heptico a travs de la induccin de CSM y/o T reg en hgado y bazo. La comprension de los eventos celulares y moleculares que regulan la produccin de citoquinas pro- y anti-inflamatorias y otros mediadores, as como el papel de los receptores de la inmunidad innata durante la infeccin con T. cruzi contribuir a responder interrogantes que son claves para el diseo de nuevas estrategias de intervencin inmune tendientes a preservar los mecanismos de defensa del husped.
Resumo:
El Trypanosoma cruzi, agente causal del Chagas, atraviesa la placenta, pudiendo infectar el feto y causando la enfermedad de Chagas congnita. Hay evidencias de que la competencia inmunolgica de la placenta juega un rol en la transmisin congnita. El proceso de infeccin placentario puede verse modificado por el juego entre factores deletreos para T. cruzi, como el xido ntrico (NO), estrs nitrosativo-oxidativo (EO) y la cantidad de parsitos y capacidad de la clula parasitaria de resistir, invadir y proliferar dentro del tejido placentario. El factor inhibitorio de la migracin de macrfagos (MIF) es una citoquina proinflamatoria que juega un importante rol inmuno-regulatorio que estimula la produccin de NO. Por ello postulamos como hiptesis que T. cruzi incrementa la produccin de MIF en placenta, con aumento de citoquinas proinflamatorias, xido ntrico e incremento del estrs nitrosativo, participando en la infeccin de la placenta y el mecanismo de transmisin congnita de la enfermedad. Los objetivos especficos son: a)Analizar el sistema MIF - ICAM1 - NO en la infeccin de explantos de vellosidades placentarias por formas trypomastigotes del T. cruzi en diseos experimentales in vitro. b)Verificar estado de estrs oxidativo-nitrosativo y alteraciones de la barrera placentaria inducido por xido ntrico en explantos placentarios en presencia de T. cruzi in vitro. c)Analizar la expresin de MIF e ICAM-1 en placentas en un modelo de Chagas congnito en ratones infectados con T. cruzi de la cepa Tulahuen con dieta normoproteica y normocalorica. d)Verificar nivel de transmisin congnita en las cras de ratones infectados por T. cruzi segn expresin de MIF e ICAM1 con dietas normales para estos animales. Los diseos experimentales sern in Vitro mediante empleo de explantos de placentas en cultivo en interaccin con formas infectivas de T. cruzi y diseos en ratones en un modelo de transmisin congnita. Las tcnicas a emplear sern cultivos de tejidos, tcnicas inmunohistoqumicas, western blot, PCR y qPCR, RT-qPCR, mediciones analticas en medios de cultivos y plasma y suero de ratones. Esperamos encontrar una respuesta inflamatoria exacerbada, como ya ha sido descripta en embarazadas que produjeron transmisin congnita de la enfermedad de Chagas a sus hijos, el incremento de citoquinas pro-inflamatorias y del estrs nitrosativo como el observado in vitro inducido por T. cruzi, (resultados preliminares) que podran daar la barrera placentaria y favorecer la transmisin congnita de la enfermedad de Chagas mediada por MIF. Como MIF se puede detectar en circulacin sangunea de la embarazada que en parte es aportado por la placenta (Cardalopolis y col., 2012), podra emplearse como un indicador de la probabilidad de transmisin congnita de la enfermedad.
